一、聚酰胺薄層層析分離原理:
用于薄層層析分離的聚酰胺基團有兩類:錦綸66(尼龍)和錦綸6,這兩類材料中都含有大量的酰胺基團,故統稱為聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-與極性化合物的-OH或=O之間形成氫鍵,從而發生吸附作用。不同物質與聚酰胺之間形成氫鍵的能力不同。在聚酰胺薄膜上做層析分離時,流動相從薄膜表面流過,被分離物質在溶劑和薄膜之間按分配系數的大小發生不同速率的吸附與解吸過程,從而使混合物得到有序的分離。聚酰胺薄層層析分離常與離心機分離技術結合使用。
二、影響遷移率的主要因素:
1、成鍵基團數目越多,吸附力越大。
2、成鍵基團的位置影響氫鍵數目和強度。
3、芳香環和共雙鍵越多,成鍵越強。
4、被分離物質分子內氫鍵的形成可以削弱它與聚酰胺之間氫鍵的形成。
5、溶劑的影響。
三、聚酰胺薄層層析分離特點:
1、對極性化合物有特異的分辨能力。
2、靈敏度高。
3、操作方便,速度快。
4、樣點不擴散。
5、有熒光的物質可用紫外燈檢出,不必噴顯色劑顯色。
四、聚酰胺薄層層析分離應用:
可分離多種化合物,在蛋白質或肽的N末端殘基分析中是比較理想的分離方法。