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  近日，華南理工大學王均教授團隊找到一種能夠高效遞送CRISPR/Cas9進入巨噬細胞進行基因編輯的納米遞送系統，該成果以“Targeting of NLRP3 inflammasome with gene editing for the amelioration of inflammatory diseases”為題在線發表在國際著名期刊Nature Communications雜志。

  CRISPR/Cas9，全稱規律成簇間隔短回文重復序列/CRISPR相關蛋白9，是一種通過RNA引導Cas9核酸酶對外源遺傳物質進行切割的細菌適應性免疫系統。以最常用的化膿性鏈球菌來源的SpCas9系統為代表，SpCas9核酸酶通過一個gRNA識別基因組中5’-NGG-3’的PAM區對特定的DNA靶位點進行切割，引起非同源末端連接（NHEJ）或同源重組（HR）DNA修復機制，實現對特定基因位點的編輯。目前基于CRISPR/Cas9的基因治療方法已被成功用于多種單基因/多基因遺傳疾病、腫瘤和病毒感染性疾病的基因治療嘗試，超過20種CRISPR/Cas9相關的臨床治療實驗在陸續展開。但是，如何將CRISPR/Cas9高效遞送到體內的細胞中進行基因編輯是目前亟待解決的問題。

  王均教授團隊之前發展了一種基于FDA批準藥用的聚乙二醇-聚乳酸（PEG-PLA）或者聚乙二醇-聚乳酸/乙醇酸嵌段聚合物（PEG-PLGA），通過摻入陽離子脂質，按照雙乳化法制備的陽離子脂質輔助的聚合物納米顆粒（Cationic Lipid-Assisted polymeric Nanoparticles, CLAN），通過CLAN納米顆粒可以有效遞送siRNA進入腫瘤細胞、T細胞和巨噬細胞等多種細胞發揮基因沉默功能。

  為了實現對CRISPR/Cas9的體內高效遞送，王均教授團隊對CLAN做了進一步的改進。首先，團隊成員制備了一系列具有不同特性的CLAN納米顆粒庫，并通過體內篩選從中找到能夠高效遞送CRISPR/Cas9進入巨噬細胞的CLAN納米顆粒。隨后，王均教授團隊利用篩選的CLAN納米顆粒將Cas9 mRNA和靶向NLRP3基因的gRNA（mCas9/gNLRP3）高效遞送到小鼠體內的巨噬細胞中，通過敲除NLRP3基因，抑制NLRP3炎癥小體被多種炎癥刺激劑活化，成功實現對小鼠敗血癥、腹膜炎以及II型糖尿病的預防或治療。該研究成果找到了一種能夠高效遞送CRISPR/Cas9進入巨噬細胞進行基因編輯的納米遞送系統，為巨噬細胞功能干預和相關疾病治療提供了新的技術手段，同時王均教授團隊正在努力對CLAN做后續的改進，以解決針對更多細胞的體內CRISPR/Cas9遞送難題。

  論文的共同第一作者是許從飛博士和魯紫東博士，通訊作者是王均教授，華南理工大學為論文的第一單位。該研究得到了科技部重大研發計劃項目（2017YFA0205601）、廣東省引進創新創業團隊項目（2017ZT07S054）以及國家自然科學基金等項目的資助。

  論文鏈接：https://www.nature.com/articles/s41467-018-06522-5