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四川大學衛(wèi)丹/范紅松 Mater. Horiz.:多巴胺整合的全凝膠多電極陣列用于神經(jīng)活動記錄
2024-10-14  來源:高分子科技

  導電凝膠由于具有類組織的力學強度和高含水量特性,是構建生物活性界面的首選材料。全凝膠神經(jīng)電極通過集成凝膠基導電傳感層和絕緣封裝層,能夠最大限度地減少傳統(tǒng)金屬電極植入帶來的炎癥反應和膠質瘢痕生成。通常的導電凝膠需要整合導電填料(金屬納米顆粒、導電聚合物、碳納米管等)來獲得較高的導電性。但是,添加的剛性導電填料往往會降低電極的柔性并增加其力學強度,從而導致腦組織-電極界面的機械失配。此外,電極層-絕緣層、絕緣層-組織層之間的界面粘附性能直接影響神經(jīng)電信號的監(jiān)測質量。本研究通過雙策略誘導的PEDOT:PSS相分離構建出具有超高電導率的導電凝膠材料,并獲得優(yōu)于金屬電極材料的信噪比。進一步地,通過多酚化學介導的層間粘附,制備了具有絕緣層-傳感層-屏蔽層等多層結構整合的多電極陣列,并成功應用于大鼠癲癇信號記錄與電刺激加載。



  近日,四川大學范紅松教授、衛(wèi)丹博士等設計開發(fā)了一種具有絕緣層-傳感層-屏蔽層等多層結構整合全凝膠神經(jīng)電極,通過多巴胺(DA/激光雙策略處理誘導PEDOT:PSS的可控相分離,獲得具有超高電導率的導電凝膠傳感層,并通過整合DA修飾的絲素封裝層以及復合Mxene的電磁屏蔽層,實現(xiàn)了多酚化學介導的多層結構之間的穩(wěn)定界面粘附。由于傳感層材料的超高導電性與多層界面之間的穩(wěn)定性,該電極具有極高的電信號檢測精度和遠優(yōu)于商用銀電極的信噪比。并進一步通過體內實驗證明,該電極能夠準確監(jiān)測癲癇大鼠腦組織內單個和多個神經(jīng)元的微弱神經(jīng)活動信號,并能在癲癇發(fā)作期間對其大腦皮層實施電刺激,為神經(jīng)退行性疾病的研究提供了有力工具。


1.激光/DA雙策略誘導PEDOT:PSS相分離構象轉化,從而促進其電化學性能增強


  PEDOT:PSS為兩相分布的導電高分子,其中疏水的PEDOT+為導電相,親水的PSS-為絕緣相。誘導PEDOTPSS兩相分離是調控PEDOT:PSS凝膠電導率的主要手段。該研究團隊利用DAPSS之間的正負電荷相互作用,削減PEDOTPSS之間的庫侖力,初步促進PEDOT:PSS的相分離,隨后利用激光進一步調控PEDOT:PSS的相分離程度。激光的高分辨率加工特性賦予了其精細的多陣列電極(MEAs)設計能力,能夠在誘導PEDOT:PSS相分離的同時實現(xiàn)圖案化電路的生成。此外,激光熱效應能夠促進絕緣PSS的熱解,進一步提升體系中PEDOT的比例。結果證實,雙策略處理后的PEDOT:PSS中檢測到更高的載流子含量,并展現(xiàn)出更強的電化學性能和更高的電導率。


2.封裝層電磁屏蔽層設計


  引入絕緣封裝層是避免多通道記錄中信號串聯(lián)干擾的關鍵。該團隊采用DA修飾的天然高分子絲素蛋白(SF)作為封裝材料,并通過聚乙二醇二縮水甘油醚(PEGDE)交聯(lián)制備出絲素基凝膠(PSFD)封裝層,PSFD凝膠展現(xiàn)出良好的拉伸性、光學透明度和組織匹配的機械模量。同時,通過引入復合MxeneDA修飾透明質酸(HAD)凝膠制備出能夠免除電磁干擾EMI)的凝膠屏蔽層(MHD),MHD三維多孔結構及內部Mxene的層狀結構有利于電磁波的反射和散射耗散,使其具有優(yōu)異的EMI屏蔽性能。結果證實,MHD在常見電磁波的X波段表現(xiàn)出43.2 dB的高屏蔽效能,能夠有效阻擋超過96.64%的入射電磁波,且濕環(huán)境更有利于EMI屏蔽功能,有利于神經(jīng)電極在應用中減少環(huán)境噪聲、提高信噪比。


3. 全凝膠電極的制備及表征


  全凝膠神經(jīng)電極的制備過程展示如下:PSFD絕緣封裝層上沉積DA摻雜的PEDOT:PSS薄膜,經(jīng)激光蝕刻形成16通道圖案,再經(jīng)過后清洗處理形成MEAs;在獲得的MEAs上覆蓋另一層PSFD絕緣封裝層,并選擇性地進行二次激光蝕刻以暴露電極點;最后再覆蓋MHD屏蔽層,以形成具有四層結構的神經(jīng)電極。該電極通過DA在各層間的引入,實現(xiàn)了層間的緊密集成與穩(wěn)定的界面適應性,確保了神經(jīng)信號采集的可靠性和穩(wěn)定性。


4. 在體多通道局部場電位(LFP)監(jiān)測


  隨后,使用該神經(jīng)電極檢測體內電皮質圖(ECoG)記錄探究神經(jīng)活動。在4-氨基吡啶(4-AP)誘導的大鼠癲癇模型中,該神經(jīng)電極展現(xiàn)出優(yōu)異的LFP捕獲能力,能夠記錄癲癇大鼠在靜息態(tài)、癲癇態(tài)和電神經(jīng)調控后的恢復態(tài)下的相關信號。結果顯示,LFP振幅在靜息態(tài)保持低水平;癲癇發(fā)作期間振幅快速波動并隨病程進展增大,出現(xiàn)典型尖波;電刺激后振幅穩(wěn)定并基本恢復正常。多通道LFP信號的時頻譜圖反映了癲癇發(fā)作期間異常神經(jīng)元放電導致的頻譜功率增強,以及電神經(jīng)調節(jié)誘導的能量降低。與常規(guī)金屬電極相比,凝膠電極記錄的信號信噪比幾乎高出10倍,且背景噪聲更低,且在植入兩周后仍保持較高信噪比和LFP振幅水平。


5. 在體多通道動作電位(AP)監(jiān)測


  由于MEAs的加工精度(約15 μm)與神經(jīng)元尺寸相匹配(小于100 μm),全神經(jīng)電極極實現(xiàn)了對單個或多個神經(jīng)元動作電位的精準監(jiān)測。在4-AP誘導的大鼠癲癇模型中,通過閾值法進一步研究了神經(jīng)元尖峰行為,發(fā)現(xiàn)多通道記錄的動作電位幾乎同時出現(xiàn),與異常神經(jīng)元的同步放電相關。通過計算不同記錄通道相對于通道1的尖峰時間延遲,發(fā)現(xiàn)記錄的電信號顯示出明顯的規(guī)律性和位置依賴性,符合癲癇持續(xù)狀態(tài)的異常神經(jīng)元放電特征。并且,通過電神經(jīng)調節(jié)能夠有效抑制癲癇樣放電活動。此外,該全凝膠神經(jīng)電極在顱內植入2周后未引起明顯的組織損傷或炎癥反應,顯示出其在臨床診斷、監(jiān)測和治療中的長期應用前景。


  總結:該研究團隊制備了一種多層集合的全凝膠神經(jīng)電極,通過雙策略誘導的PEDOT:PSS相分離實現(xiàn)傳感層的超高導電性,并結合多酚化學實現(xiàn)穩(wěn)定的層間粘附性。基于此,該神經(jīng)電極獲得了卓越的電化學穩(wěn)定性。體內實驗表明,該神經(jīng)電極能精準記錄癲癇大鼠的LFP信號,且能夠區(qū)分兩個不同神經(jīng)元的尖峰信號。同時,該神經(jīng)電極還能在癲癇發(fā)作期間向大鼠大腦皮層提供人工電刺激。這些結果都證明了該全凝膠神經(jīng)電極在研究神經(jīng)退行性疾病發(fā)展、功能及治療中的巨大潛力


  以上研究成果近期以“Dopamine-integrated all-hydrogel multi-electrode arrays for neural activity recording”為題,發(fā)表在《Materials Horizons》上。四川大學生物醫(yī)學工程學院/國家生物醫(yī)學材料工程技術研究中心曾明澤博士為文章第一作者,范紅松教授和衛(wèi)丹博士后為文章的共同通訊作者。該研究得到了國家自然科學基金、四川省自然科學基金等資助。


  原文鏈接:https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2024/mh/d4mh00939h

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